Пентагастрин CAS 5534-95-2

Целева последователност: Boc- -Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂. Приета е стратегия за последователна кондензация на AC-към-N терминал, като L-фенилаланинамид служи като C-терминален изходен материал.

Селективна защита на страничната -верига се прилага за отделни аминокиселини: -карбоксилната група на аспарагиновата киселина е защитена чрез бензилова естерификация, индоловата част на триптофана претърпява леко затваряне и Вос се използва за преходно екраниране на амино-групата.

Използвайки класически DCC/HOBt като кондензационни реагенти, свързването протича при ниска температура в DMF, с последователно включване на Asp, Met и Trp, последвано от окончателно конюгиране с Boc- -аланин.

Пост-кондензацията, ниско-температурната хидрогенолиза премахва бензил-базираните странични-верижни защитни групи, а остатъчните следи от Boc групи се разцепват при леко третиране с TFA.

Концентрираният суров продукт се прекристализира от смесена система от разтворители ацетонитрил-вода. Отличаващ се с ниски капиталови инвестиции в производствено оборудване, този процес е широко възприет за ранно масово производство на лекарства с общ добив, вариращ от 32% до 38%. Основните му недостатъци включват тромавата междинна изолация и прекомерното изхвърляне на отпадъци, което води до постепенно заместване с технология за синтез на твърда{5}}фаза.

2-хлоротритил хлоридна смола (CTC смола) е избрана като твърда подложка. Fmoc-Phe-NH₂ първо се закотвя към матрицата на смолата и незаетите места на реактивна смола се затварят с метанол.

С DMF като реакционна среда, отстраняването на Fmoc защитата е завършено с помощта на пиперидин и карбоксилното активиране е реализирано с HBTU/HOBt. Fmoc-Asp(OBzl), Fmoc-Met и Fmoc-Trp се свързват последователно от C-края към N-края, а крайният Boc- -Ala (Fmoc-free) се въвежда в последния етап.

Отцепването от смолата и глобалното премахване на защитата на страничната -верига се извършват при температура на околната среда с TFA коктейл за разцепване; смолата се отстранява чрез филтруване и концентрираният филтрат се подлага на препаративно обратно{1}}фазово HPLC пречистване върху С18 колона с градиентно елуиране на ацетонитрил-вода, последвано от лиофилизация, за да се получи насипна фармацевтична суровина с висока-чистота с чистота, по-голяма или равна на 98,5% и общ добив между 52% и 60%.

Този метод включва минимални странични реакции и лесно пречистване, като отговаря на производствените спецификации за фармакопеен-клас активни фармацевтични съставки. През последните години оптимизираните -благоприятни за околната среда процедури, използващи -несъдържащи флуор реагенти за разцепване, намалиха драстично замърсяването на отпадъчните-води и се превърнаха в предпочитана производствена технология за фармацевтичните производители по целия свят.

През 1905 г. британският физиолог Едкинс излага хипотезата, че антралната вентрикуларна лигавица секретира гастрин, хуморален фактор, който модулира отделянето на стомашна киселина чрез кръвообращението.

Ограничена от недостатъчни технологии за пречистване, тази хипотеза остава спорна и недоказана почти половин век. През 1926 г. китайският физиолог Lin Kesheng потвърди съществуването на стомашно-чревни ендокринни вещества чрез експерименти с животни и допълни физиологичната рамка на хипотезата за гастрина, но естественият мономерен гастрин не беше изолиран.

Едва през 1959 г. Грегъри и Трейси от университета в Ливърпул, Обединеното кралство, пречистват естествения хептадекапептид гастрин G17 от свинска антрална лигавица, използвайки противотоково разпределение и сефадекс гел хроматография. Тяхното потвърждение на киселинно-стимулиращата му активност постави солидни химически и физиологични основи за изследване на гастрина.

През 1964 г. същият изследователски екип завърши пълното секвениране на аминокиселините на G17. Сегментният синтез и скрининг потвърдиха, че C-терминалният тетрапептид Trp-Met-Asp-Phe-NH₂ съставлява фармакофорното ядро, като напълно запазва капацитета за свързване-на естествения гастринов рецептор и стимулиращата активност на стомашната киселина-, докато дългото N-терминалната аминокиселинна верига регулира само метаболизма in{10}}in vivo без съществена фармакологична функция.

На фона на спешното клинично търсене на стандартизирани диагностични реагенти за функцията на стомашната киселина и високата цена плюс ограниченото предлагане на извлечен естествен хептадекапептид, ICI Pharmaceuticals си сътрудничи с физиологични изследователи, за да стартира проект за развитие.

Чрез конюгиране на Boc-защитен -аланин към амино края на активния тетрапептид е конструирано по-стабилно пентапептидно производно, което да устои на бърза ензимна хидролиза in vivo.

Пълен химичен синтез напентагастрине осъществено от изследователската група на Konturek през 1967 г. с-инвитро и тестове върху животни, потвърждаващи неговата киселинна-секретогенна активност, еквивалентна на нативния гастрин. Агентът получи одобрение за пускане на пазара в Европа през същата година и оттогава се превърна в златен-стандартен реагент за тестване на отделянето на стомашна киселина.

Последващи одобрения бяха дадени в Съединените щати, Япония и Китай за скрининг на гастрином и оценка на функцията на париеталните клетки. Започвайки от 90-те години на миналия век, приложението му се разшири във фундаментални изследвания като фармакологично средство за съединение, насочено към CCK-B рецептора, и до днес остава класическо референтно съединение в храносмилателната фармакология.