IPTG реагент CAS 367-93-1

IPTG реагентние се фокусираме върху технологията на органичния синтез от 2008 г. насам. Ние можем да разработим високо-качествени продукти, напълно зависими от нашия изискан екип за научноизследователска и развойна дейност. IPTG, CAS 367-93-1, химична структура, съставена от изопропил - Състои се от D-тиогалактозидни и фосфатни групи. Сред тях - D-тиогалактозидът е аналог на галактозата, в който серният атом замества кислородния атом. Тази специална гликозидна структура позволява на IPTG да се свърже с ДНК и да индуцира генна експресия. IPTG има ниска разтворимост във вода, но може да се разтвори добре във физиологичен разтвор и фосфатен буфер. Той е кисел с pKa стойност 4,5, което е свързано с фосфатната група в неговата молекулярна структура. Не е лесно да кристализира в чиста вода, но може да образува кристали в разтвори с висока концентрация или когато се добавят други съединения. Поради способността си да индуцира експресия на бактериален протеин, IPTG е чувствителен към определени микроорганизми.

Ние не правим нищо срамно за Great Chemistry! Не се доверявайте на неразумната цена, моля, сравнете цената на същото ниво на качество.

Методът на биосинтеза наIPTG реагентобикновено използва каталитичното действие на микроорганизми или ензими за превръщане на галактозата в изопропилова група- - D-тиогалактозид.

Галактоза като суровина

Първо, необходимо е да се използва галактоза като суровина. Галактозата е петвъглеродна захар, която е широко разпространена в природата и може да се получи под формата на сироп или кристали. При биосинтеза галактозата се превръща в изопропил чрез поредица от ензимни реакции- - D-тиогалактозид.

Микробна култура и метаболизъм на галактоза

След това е необходимо да се изберат подходящи микроорганизми като катализатори, които обикновено включват бактерии, дрожди и плесени. Култивирайте тези микроорганизми в хранителна среда, за да им позволите да растат и да се възпроизвеждат при подходящи условия. Междувременно галактозата, като хранително вещество, се консумира от микроорганизми и се метаболизира в желания междинен продукт чрез серия от ензимни реакции. Специфичният реакционен механизъм и химическото уравнение в този етап варират в зависимост от видовете микроорганизми и условията на култивиране.

Реакцията на изомеризация генерира изопропилова група- - D-тиогалактозид-5 '- фосфатен естер

Под действието на ензими, произведени от микроорганизми, междинните продукти претърпяват реакция на изомеризация, генерирайки изопропилови групи- - D-тиогалактозид-5 '- фосфатен естер. Реакционният механизъм на този етап е да прехвърли хидроксилната група на галактозата към уридин трифосфат, генерирайки изопропилова група - - D-тиогалактозид-5'-фосфат и уридин дифосфат. Специфичното химично уравнение е както следва:

(CH₂ох)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂ох)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Групата за премахване на защитата генерира изопропилова група- - D-тиогалактозид

Последната стъпка е да се премахне защитната група от изопропиловата група- - Превръщане на D-тиогалактозил-5 '- фосфатен естер в целевия продукт изопропил- - D-тиогалактозид. Тази стъпка обикновено изисква използването на киселинен или алкален разтвор като катализатор за насърчаване на реакцията. Специфичното химично уравнение е както следва:

(CH₂ох)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂ох)₂CHOH-OH + P (i)

Разделяне и пречистване

Чрез използване на техники за разделяне и пречистване като екстракция, адсорбция, хроматография и др., целевият продукт изопропил се пречиства - - D-тиогалактозид се екстрахира от реакционната смес. Целта на тази стъпка е да се премахнат примесите и да се подобри чистотата на продукта, за да отговори на нуждите на практическите приложения

IPTG реагентИзопропил- -D-тиогалактозид, английско име IPTG. Като плацебо индуктор, X-gal е хромогенен субстрат, като и двата се използват за синьо-бял скрининг. IPTG може да индуцира ДНК сегмента на lac оперона на вектора на Chemicalbook да синтезира амино-терминалния фрагмент на -галактозидазата, което може да постигне интрагенно допълване (комплементиране) с дефектната -галактозидаза, кодирана от клетките гостоприемници.

1. Подготовка на биоматериал:

IPTG може да се използва за приготвяне на определени биоматериали, като полизахариди, липозоми и др. Чрез свързване към специфични клетъчни мембрани или протеини, IPTG може да насърчи специфични физиологични функции на клетки или тъкани, предоставяйки нови изследователски инструменти и терапевтични стратегии за областта на биомедицинското инженерство. Например, чрез използване на IPTG като индуктор, той може да насърчи експресията и секрецията на целеви протеини в инженерни бактерии или клетки от дрожди, които могат да се използват за производство на биоматериали със специфични функции.

 

Тези биоматериали могат да включват полизахариди, липозоми, протеинови комплекси и др.
В процеса на приготвяне на биоматериали използването на IPTG може да опрости производствения процес, да подобри ефективността на производството и да намали производствените разходи. В същото време може да се постигне прецизно регулиране на нивата на експресия на целевия протеин и свойствата на биоматериала чрез контролиране на количеството и продължителността на добавяне на IPTG.

2. Скрининг на лекарства:

 

IPTG се използва главно при скрининг на лекарства за индуциране на експресията на целевите гени и скрининг на експресионните продукти на целевите гени. По-конкретно, IPTG може да служи като индуктор на лактозни оперони чрез свързване към lac|продукти, причиняващи конформационни промени на лак|продукти далеч от lacO, като по този начин активира транскрипцията и постига висока експресия на целевия ген. По време на процеса на синьо-бял скрининг, трансформанти без рекомбинантни плазмиди се индуцират от IPTG да образуват сини колонии в присъствието на хромогенен субстрат X-gal.

Когато се вмъкнат чужди фрагменти, получените пептидни фрагменти се губят Допълнителна способност: Трансформирани рекомбинанти, съдържащи рекомбинантни плазмиди, могат да образуват само бяла Escherichia coli върху хромогенна индукционна среда. Този метод за скрининг на лекарства, базиран на промени в цвета, играе важна роля в изучаването на протеини, свързани със специфични заболявания и търсенето на нови лекарствени цели.

3. Генетични изследвания:

 

IPTG често се използва като молекулярен инструмент в генетичните изследвания. Чрез свързване към специфична генна последователност, IPTG може да регулира нивото на експресия на този ген, като по този начин изучава връзката му със специфични фенотипове или заболявания.
В генетичните изследвания IPTG се използва главно като индуктор и може да симулира индукционния ефект на лактозата върху лактазата. Обикновено се използва за индуциране на експресията на екзогенни гени, особено в изследванията на молекулярната биология и генното инженерство.
Когато се използва IPTG, той се свързва с целеви гени в експресионни гостоприемници като Escherichia coli. Чрез конструиране на целевия ген с подходящи промотори и регулаторни елементи в експресионния вектор, той може да произведе протеини в клетки на Escherichia coli. Този индуциран ефект е от голямо значение за изучаване на генната функция, протеиновите взаимодействия и разработването на нови лекарства и биоматериали.

В допълнение, IPTG може също да се използва като индуктор в експерименти за кристализация на протеини за насърчаване на кристализацията на протеини. Неговият механизъм на действие е да промени конформацията на протеините чрез свързване с хидрофобни области в протеините, като по този начин насърчава агрегацията и кристализацията между протеиновите молекули.

Този процес на агрегиране и кристализация е обратим, така че кристализацията на протеин може да бъде индуцирана чрез добавяне на IPTG или протеиновите кристали могат да бъдат разтворени чрез отстраняване на IPTG.

4. Селскостопанско приложение:

 

В селскостопански приложения,IPTG реагенткато нов вид биопестицид, има специфични хербицидни ефекти. Може да попречи на нормалния метаболизъм на галактозата в растенията, като по този начин повлияе на нормалния им растеж. Този метод на намеса е по-чувствителен към някои плевели, така че използването на IPTG може ефективно да премахне плевелите, без да навреди на културите. Междувременно, тъй като IPTG е нов тип биопестицид, той има по-добра екологичност и по-висока безопасност за хора и животни в сравнение с традиционните химически пестициди. Следователно IPTG има широки перспективи за приложение в селскостопанските приложения.

Потенциална намеса в регулирането на генната експресия

 

Неспецифична индукция

IPTG, като индуктор, има известна специфичност в действието си, но в някои случаи може да възникне неспецифична индукция. IPTG не само индуцира експресията на целевите гени, но може също да повлияе експресията на други гени в клетките. Това може да се дължи на факта, че след като IPTG се свърже с репресорния протеин, той променя конформацията и функцията на репресорния протеин, което го кара да има определени ефекти върху други оперони, като по този начин облекчава инхибирането на експресията на нецелевия ген.

Неспецифичната индукция може да доведе до промени във вътреклетъчните профили на експресия на протеини, произвеждайки неочаквани протеини, които не само пречат на анализа и преценката на експерименталните резултати, но могат също така да имат неблагоприятни ефекти върху нормалните физиологични функции на клетките. Например, в някои експерименти с протеинова експресия, след индуциране с IPTG, в допълнение към откриването на повишаване на експресията на целевия протеин, беше установено също повишаване на експресията на някои други неизвестни протеини. Тези не-специфично експресирани протеини могат да попречат на пречистването и функционалните изследвания на целевия протеин.

Необратимост на индуцирана експресия

При нормални обстоятелства, след отстраняване на индуктора, генната експресия трябва да се върне към нивото си преди индукция. Проучванията обаче показват, че индуцираната от IPTG генна експресия може да има известна степен на необратимост. След като IPTG се използва за индуциране на генна експресия, дори ако IPTG бъде премахнат, нивото на генна експресия все още може да остане на високо ниво и не може да бъде възстановено до базовото ниво преди индукцията.

Тази необратимост може да се дължи на дългосрочни-вътреклетъчни промени, предизвикани от IPTG, като промени в структурата на хроматина и модификации на транскрипционните фактори, които поддържат високо ниво на генна транскрипционна активност. Необратимостта на индуцираната експресия може да причини големи трудности в експериментите, особено в експерименти, които изискват прецизно регулиране на нивата на генна експресия, което може да доведе до неточни и невъзпроизводими експериментални резултати.

Въз основа на своята стабилна молекулярна структура и надеждна индуцираща активност, IPTG се превърна в незаменим реагент в лабораториите по молекулярна биология по целия свят. Той се използва широко в експресия на рекомбинантен протеин, изследване на генната функция и експерименти с микробно инженерство, осигурявайки стабилни индукционни ефекти за научни изследвания и промишлено производство. Нашият дългосрочен- фокус върху технологията на органичния синтез и стриктният контрол на качеството гарантира, че нашите IPTG продукти поддържат висока чистота, стабилност и последователност, като ефективно отговарят на взискателните изисквания на научните експерименти и индустриалните приложения.

Подкрепени от професионален екип за научноизследователска и развойна дейност, ние продължаваме да оптимизираме процесите на синтез и да подобряваме производителността на продукта, за да обслужваме по-добре глобалните изследователи и производители. Със своя ясен механизъм на действие, стабилни свойства и широка приложимост, IPTG ще остане основен реагент в научните изследвания за живота и ние ще продължим да предоставяме високо-качествени продукти и професионална техническа поддръжка за напредъка на биотехнологиите.

Популярни тагове: iptg реагент cas 367-93-1, доставчици, производители, фабрика, търговия на едро, купуване, цена, насипно състояние, за продажба