Епиталон(линк:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/epitalon-powder-cas-307297-39-8.html) е пептидна молекула, за която се счита, че има добра биологична активност и потенциална медицинска стойност. Понастоящем изследванията на епиталон пептида са фокусирани главно върху приложението му като средство против стареене.
Epitalon може да удължи дължината на теломерите в краищата на хромозомите чрез активиране на теломераза, като по този начин повлиява положително пролиферацията и регенерацията на стволовите клетки. Проучванията показват, че Epitalon може значително да инхибира вредния оксидативен стрес, да намали увреждането на ДНК и да регулира експресията на инсулиноподобен растежен фактор -1 (IGF-1) и накрая да постигне ефекта на намаляване на скоростта на стареене и удължаване на живота.
В допълнение, Epitalon също има имуномодулиращи и невропротективни ефекти. Epitalon може да засили човешкия имунитет и да насърчи разпознаването и изчистването от организма на хетерогенни и собствени антигени. В допълнение, Epitalon може също да намали смъртта на невронните клетки и невродегенерацията, като по този начин постига невропротективни ефекти. Epitalon също има противоракови ефекти и упражнява своите ефекти чрез регулиране на клетъчния цикъл, насърчаване на клетъчната апоптоза и инхибиране на пролиферацията на туморни клетки.
|
|
|
Epitalon е подобрител на тялото, полипептидно съединение, съставено от четири аминокиселини аланин (Ala), глутаминова киселина (Glu), аспарагин (Asp) и лизин (Lys). Методите за синтез на Epitalon се разделят главно на химичен синтез и биосинтез.
Метод на химичен синтез:
Epitalon е пептид, съставен от четири аминокиселини с молекулна формула C14H22N4O9. Epitalon може да стимулира освобождаването на човешки хормон на растежа, като по този начин помага за забавяне на стареенето, подобрява съня и повишава имунитета.
1. Подготовка на реагента:
Реагентите за синтеза на Epitalon включват четири аминокиселини, аланин (Ala), глутаминова киселина (Glu), аспарагин (Asp) и лизин (Lys), както и ацилиращи реагенти като Boc-Lys-OtBu и Asp(OtBu) 2 и така нататък. Чистотата на тези аминокиселини и реактиви трябва да бъде по-висока от 99 процента, в противен случай качеството на продукта ще бъде засегнато.
2. Етапи на химичен синтез
2.1 Синтез на аланин-4-хидроксимаслен анхидрид (Ala-Hyp):
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95 процента чистота.
2.2 Синтез на Ala-Hyp-Glu-OtBu:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 процента
2.3 Синтез на Epitalon:
Добавете Asp(OtBu)2 и Boc-Lys-OtBu в системата за реакция на кондензация в реда, проектиран предварително, и преминете през множество реакции на кондензация, за да получите Epitalon. Процесът е както следва:
а. Групова реакция за премахване на защитата:
Първо, защитата на Asp(OtBu)2 беше премахната и защитната група на Asp(OtBu)2 беше отстранена с помощта на натриев хидроксид (NaOH) и трихлороцетна киселина (TCA), за да се генерират Asp структурни единици и да се освободи BuOt едновременно. Реакционното време е 1 час и температурата е стайна. След реакцията се извършва киселинно-алкална неутрализация, добавя се голямо количество наситен разтвор на натриев хлорид, след това се утаява с етанол и се изсушава във вакуум, за да се получи Asp като бяло твърдо вещество.
b. Реакция на кондензация:
Добавете Asp и Ala-Hyp-Glu-OtBu в системата за реакция на кондензация и след това извършете множество реакции на кондензация, за да получите Epitalon. Този процес трябва да се извърши чрез различни обработки.
Първата стъпка: премахнете защитната група Ala-Hyp:
Първо, Ala-Hyp-Glu-OtBu се разтваря в метанол, трихлороцетна киселина (TCA) и вода се добавят за отстраняване на защитната група Hyp-OtBu, използвана за защита на аминогрупата за генериране на Ala-Hyp-Glu-OH. Реакцията трябва да се проведе при стайна температура и реакционният разтвор се третира с NaOH след реакцията, за да се неутрализира киселинността.
Втората стъпка: премахнете защитната група Glu-OtBu:
След това, след пълно изсушаване, Ala-Hyp-Glu-OH се смесва с Boc-Lys-OtBu, отново се добавят трихлороцетна киселина и вода и реакцията се провежда при стайна температура. Тази реакция премахва Glu-OtBu защитната група, за да генерира Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Третата стъпка: премахване на защитната група Lys:
Накрая, добавянето на трихлороцетна киселина, вода и метанол премахва Boc-Lys-OtBu защитната група, за да се генерира Epitalon. Реакцията трябва да се проведе при стайна температура и реакционният разтвор се третира с NaOH след реакцията, за да се неутрализира киселинността.
3. Анализ на резултатите:
Накрая се получава продуктът Epitalon, който може да бъде характеризиран и пречистен чрез различни аналитични методи. Например, параметри като чистота, примеси и тегло могат да бъдат определени с помощта на методи за пречистване като Европейската фармакопея (EP) или Фармакопеята на Съединените щати (USP).
4. Резюме:
Epitalon е бустер за тяло, съставен от четирите аминокиселини аланин, глутаминова киселина, аспарагин и лизин. Методът на химически синтез на Epitalon включва основно метод на синтез в твърда фаза и метод на синтез в течна фаза, които трябва да свържат различни аминокиселини заедно чрез многоетапни реакции. Този процес изисква внимателен контрол на реакционните условия и техниките за пречистване, за да се осигурят продукти с висока чистота.
Биосинтетичен метод:
Методът на биосинтеза е да се използва биокатализата на микроорганизми или синтетични ензими за получаване на Epitalon, включително ферментация и ензимен катализ.
1. Метод на ферментация: Методът на ферментация е биосинтетичен метод, използващ трансгенен микроорганизъм Escherichia coli за експресия на Epitalon. Първо, поставете генната последователност на Epitalon в Escherichia coli и я култивирайте масово за експресия. След това се използват различни техники за пречистване, като йонообменна хроматография и гел хроматография, за да се получат накрая чисти продукти. Конкретните стъпки са както следва:
1.1 Изберете подходящата бактерия гостоприемник:
За да се синтезира Epitalon, е необходимо да се избере подходящ щам гостоприемник за експресия. Често използваните бактерии гостоприемници включват ешерихия коли (Escherichia coli), дрожди (Saccharomyces cerevisiae) и гъби (Aspergillus oryzae). При избора на бактерии гостоприемници е необходимо да се вземе предвид дали бактериите гостоприемници имат способността ефективно да синтезират протеини, дали могат да сгъват и модифицират протеините правилно и дали могат да произвеждат целеви продукти с висок добив.
1.2 Проектиране на генна последователност и клониране:
След като бактериите-гостоприемници са избрани, генната последователност на Epitalon (включително последователности на аланин, глутаминова киселина, аспарагин и лизин) трябва да бъде вмъкната в бактерията-гостоприемник чрез технология за рекомбинация на ДНК. Обикновено генната последователност се клонира в експресионен вектор, който включва елементи като промоторни и терминаторни последователности и избираем антибиотичен маркер.
1.3 Експресия и пречистване:
След като клонирането приключи, експресионният вектор се трансформира в бактерия гостоприемник и след това се култивира. По време на процеса на култивиране бактерията гостоприемник ще синтезира Epitalon според генната последователност в експресионния вектор. След като продуктът се произведе в достатъчно количество, той може да бъде изолиран от клетките чрез различни методи за пречистване и се получава Epitalon с висока чистота.
2. Ензимно-катализиран метод: Ензимно-катализираният метод е да се синтезира Epitalon чрез свързване на различни аминокиселини с различни ензими. Например L-глутамат-5-аминазата се използва за катализиране на реакцията на глутамат и бутират за синтезиране на Glu-OtBu. След това използвайте L-аспарагиназа, за да катализирате реакцията на кондензация на аспарагин и Ala-Hyp-Glu-OtBu, за да получите Epitalon.
Методите за синтез на Epitalon се разделят главно на химичен синтез и биосинтез. Химическият синтез в момента е най-често използваният метод за синтез на Epitalon. Биосинтезата е да се подготви Epitalon чрез биокатализа на микроорганизми или синтетични ензими, включително ферментация и ензимна катализа. Въпреки че биосинтетичните методи имат голям потенциал, все още са необходими допълнителни изследвания и оптимизация. Epitalon е потенциално лекарство с широки перспективи за приложение, което може да се използва в областите против стареене, имунна регулация, невропротекция и лечение на рак. В същото време Epitalon може да се използва и като здравословна храна и продукт за грижа за здравето, за да помогне на потребителите да устоят на стареенето, да повиши имунитета и да намали риска от заболяване. Въпреки че изследванията върху Epitalon са все още в начален стадий, се смята, че със задълбочените изследвания на неговия механизъм и функция, Epitalon ще се превърне във важно лекарство и продукт за здравеопазване.