Гонадорелин ацетат пептид

Синтезът на течна фаза постепенно свързва аминокиселините чрез стратегия за защитна група в разтвор, подходящ за синтеза на къси полипептидни вериги, съдържащи специални структури като дисулфидни връзки. Ядрото се крие в последователността на селекцията и отстраняването на защитни групи, за да се избегнат странични реакции.

Депротекция и пречистване:
Използвайки TFA за отстраняване на BOC групи и пиридин за отстраняване на FMOC групи, се получава линеен пептиден пирийстпсертирглилеуаргпроглин2.
Пречистване чрез HPLC и замразяване - изсушаване, за да се получи суров гонарелин.

Предимства: Точен контрол на реакционните условия, подходящ за синтез на сложна пептидна верига; Няма нужда от твърди фазови носители, намаляване на разходите.
Ограничения: Стъпките са тромави и изискват множество пречиствания; Реакционните междинни продукти трябва да бъдат пречистени, за да се разшири производствения цикъл.

Определено проучване използва течност - фазов метод за синтез за оптимизиране на формулата за режещ реагент (88% TFA +5% анасон сулфид +5% вода +2% етапитиол), което увеличава суровия добив до 91.8% и чистотата на продукта до 9%.

Молекулярната формула на гонарелин ацетат е C ₅₇ H ₇₉ N ₁₇ O ₁₅, с молекулно тегло 1242,36 DA. Основната му структура е декапептидна верига, състояща се от следните аминокиселинни последователности:

5 - оксопропил - l - histoyl - l - Tryptophan - L - {- L -}} korphan {- L -} tryptophan - l -}} korphan {- l -} tryptophan - L -}} tryptophan {{{{1 0}} L - тирозил - глицил - L - leucyl - L - arginil - L - пролил-glycinamide.
В тази структура първият 5 - оксопролин (пироглутаминова киселина) образува циклична структура, засилвайки молекулната стабилност; Глицин (Gly) при позиция 6 и глицинамид (Gly - NH ₂) в позиция 10 са гъвкави сегменти, които дават молекулата с конформационна гъвкавост; Третият триптофан (TRP) и петият тирозин (TYR) съдържат ароматни пръстени и могат да участват в междумолекулни взаимодействия чрез π - π подреждане.
Въвеждането на ацетатна форма (CH3 COO ⁻) не само засилва разтворимостта на лекарството (с разтворимост на вода до 25 mg/mL), но също така се свързва с амино или карбоксилни групи на веригата чрез йонни връзки, образувайки стабилна солна структура и намалявайки риска от разрушаване на пептидна верига по време на съхранение.

Способността на хидроксилни, амино, карбоксилни групи да образуват водородни връзки с водни молекули изисква съхранение в суха среда, за да се избегне струпването или разграждането.
Разтворимост:
Това съединение има висока разтворимост във вода (25 mg/ml), е леко разтворимо в метанол и може да бъде напълно разтворено в 1% разтвор на оцетна киселина. Разтворимостта му се влияе значително от рН: при киселинни условия (като 1% оцетна киселина), карбоксилната протониране намалява междумолекулното електростатично отблъскване и насърчава разтварянето; В неутрална или алкална среда депротонирането на карбоксилни групи може да предизвика междумолекулна агрегация, което води до намаляване на разтворимостта.

Точка на топене и термична стабилност:
Експерименталните данни показват, че точката на топене е по -висока от 155 градуса С (разлагане), което показва силна топлинна стабилност. Въпреки това, високите температури могат да причинят хидролиза на пептидната връзка или окисляването на страничната верига на аминокиселината, така че трябва да се контролира действителното съхранение в рамките на диапазона от -20 градуса С до 8 градуса С, за да се забави разграждането.

Спектрални характеристики:
Спектърът на абсорбция на UV показва максимален пик на абсорбция при 278 nm, съответстващ на конюгираната от ароматна пръстенска система от триптофан и тирозин. Тази характеристика може да се използва за количествен анализ (като спектрофотометрично определяне на съдържанието) или за сравняване на чистотата с референтните стандарти чрез хроматография с тънък слой (TLC).

Хидролитична стабилност
Сравнително стабилни при кисели или неутрални условия, но предразположена към хидролиза на пептидна връзка в алкална среда. Например, при действието на силни основи (като NaOH), пептидната връзка между 6 -тия глицин и 7 -ия левцин може да се счупи, генерирайки къси пептидни фрагменти. В допълнение, индолският пръстен на третия триптофан е предразположен към отваряне на пръстен при леки или окислителни условия, което води до загуба на лекарствена активност.

При наличието на кислород или свободни радикали тези функционални групи могат да претърпят окислителни реакции, генерирайки пероксиди или хидроксилни производни, което от своя страна разграждане на веригата на веригата. Следователно към състави често се добавят антиоксиданти (като витамин С), за да се подобри стабилността.

Стабилност на светлината
Чувствителността към светлината, особено ултравиолетовата светлина (200-400 nm), може директно да наруши конюгираната система на триптофан или косвено да предизвика окислително разграждане чрез генериране на свободни радикали. Клиничните инжекции трябва да се опаковат в кафяви стъклени бутилки и да се съхраняват далеч от светлината.

Активност на свързване на рецепторите
Чрез свързване с висок афинитет към рецептора на GnRH в предната хипофизна жлеза през десетте му структури се задейства вътреклетъчната сигнализация (като CAMP/PKA пътя), което води до освобождаване на гонадотропини (FSH, LH). Неговата обвързваща активност зависи от:
Допълняемостта между цикличната структура на първия 5-оксопролин и рецепторния джоб;
Π - π взаимодействие между ароматния пръстен на третия триптофан и хидрофобния участък на рецептора;
Положителният заряд на 8 -ми аргинин е привличан електростатично към киселинен остатък на рецептора.

Двуфазен механизъм
Когато се прилага непрекъснато в краткосрочен план, той стимулира освобождаването на FSH/LH от хипофизата и повишава нивата на половите хормони; Дългосрочното приложение води до инхибиране на секрецията на FSH/LH поради десенсибилизация на рецепторите, в крайна сметка намалява сексуалните хормони до нивата на кастрация. Тази характеристика го прави алтернатива на хирургическата кастрация при лечението на рак на простатата, като същевременно намалява риска от хирургични усложнения.

Полиморфни продукти за разграждане:
По време на метаболитния процес в тялото могат да се генерират различни метаболити чрез ензимна хидролиза (като действие на пептидаза) или не ензимно разграждане (като окисляване). Например, шестият глицин може да бъде хидролизиран, за да генерира девет пептиден фрагмент; Окисляването на триптофана в третата позиция генерира хидроксилни производни. Активността на тези метаболити трябва да бъде идентифицирана чрез масспектрометрия (LC - ms) или ядрен магнитен резонанс (NMR), за да се оцени тяхната безопасност.
Лекарствени взаимодействия:
Когато се използва в комбинация с лекарства, съдържащи метални йони (като определени антибиотици), разтворимостта или активността нагонадорелин ацетат пептидможе да бъде намален поради хелация. В допълнение, неговата киселинна сол може да претърпи реакции на неутрализиране с алкални лекарства (като антихистамини) и трябва да се избягват смесени инжекции.