Fluorescein isothiocyanate cas 27072-45-3

Флуоресцеин изотиоцианатОранжево червено, изотиоцианат флуоресцентно жълто, изотиоцианат флуоресцентно червено, изотиоцианат флуоресцеин изомер I, 5- изотиоцианат флуоресцеин . жълт прах . е хигроскопичен . Не губи специфичността на свързването с определен антиген ., той все още има силна зелена флуоресценция в алкален разтвор . След добавяне на киселина, тя се утаява и флуоресценцията изчезва ., той е леко разтворим в ацетон, етер и петролев етер .} ous a a A diagnostic drug, which can quickly diagnose diseases caused by bacteria, viruses, parasites, etc. In addition, it can bind with various antibody proteins, and the antibody after binding does not lose the specificity of binding with certain antigen, and there is still strong green fluorescence in alkaline solution. After adding acid, it precipitates, and the fluorescence изчезва и е леко разтворим в ацетон, етер и петролен етер .

Проучване на свойствата наФлуоресцеин изотиоцианатЕтикетиран инсулин за аминиран желатин и неговото приложение в администрацията на носната лигавица:

Under the condition of no external emulsifier, the aqueous solution of aminated gelatin was dispersed in olive oil, and a new type of positively charged gel microspheres, aminated gelatin microspheres, was prepared through the processes of emulsification, gelling, dehydration and cross-linking. The average particle size of microspheres is 40-50 μ m. The size is evenly distributed. The dried microspheres can absorb about 20 times of their own weight of water to form hydrogels. Aminoated gelatin microspheres have higher amino content than gelatin microspheres. They are positively charged in distilled water and phosphate buffer solution, and the Zata Потенциалът в дестилирана вода е 41 . 5 mV.

With the increase of glutaraldehyde concentration or the extension of crosslinking reaction time, the amino content of microspheres decreased. However, regardless of the crosslinking reaction conditions, the aminated gelatin microspheres prepared by this method have higher primary amino content than the gelatin microspheres. Aminoated gelatin microspheres can be degraded бързо<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20h) В Pepsin и киселинна среда . Взаимодействието между аминирана желатинова микросфери и муцин е по-силно от това между агресинните микросфери . Високата положителна плътност на заряда на аминираните желатинови микросфери е основната причина за нейното силно взаимодействие с муцина .}} щата BioAdhesive с моцина {{4}. Микросферите са изследвани по метод на флуоресцентно етикетиране и технологията за разграждане на ензима in vitro, използвайки изолирания модел на измиване на стомашна перфузия на плъхове и in vivo експеримент при плъхове .

The results showed that under the same experimental conditions, the number of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach was more than that of gelatin microspheres, and the type of irrigation solution (artificial gastric juice or PH7 human phosphate buffer) had no significant effect on the gastric retention of microspheres, which indicated that the electrostatic interaction between the microspheres and gastric mucus was not the decisive factor for the gastric retention of microspheres in this model. However, in the experiment, it was found that the amount of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach decreased with the increase of the concentration of the crosslinking agent glutaraldehyde when preparing the microspheres, which indicated that the gastric mucosal adhesion of the aminated gelatin Микросферите могат да бъдат засегнати от съдържанието на амино на повърхността на микросферите или степента на омрежване .

The experimental results in vivo in rats showed that amino gelatin microspheres had better mucosal adhesion than gelatin microspheres. The effects of aminated gelatin on the nasal absorption of glucan and insulin were investigated in healthy rats. The results showed that 0.2% (WN) amino gelatin could Значително насърчават абсорбцията на флуоресцеин изотиоциатат глюкан от лигавицата на носа на плъхове с бионаличност 23 . 8%. След интраназално приложение на 10 IU инсулин фосфатен буфер, съдържащ 0 2% (w/v) амино желатин, нивото на глюкозата в кръвта е значително по -ниско от това на инсулиновия фосфатен буфер.

Флуоресцеин изотиоцианат(FITC), като класически флуоресцентно етикетиране на реагент, се превърна в незаменим инструмент в областта на биологията, медицината и материалите поради високия си квантов добив, отличната фотостабилност и добрата биосъвместимост .

Биомолекулни маркери: Прецизно проследяване от протеини до нуклеинови киселини

 

The isothiocyanate group (- N=C=S) of FITC can undergo covalent reactions with active groups such as amino and thiol groups in biomolecules, forming stable fluorescent labeling complexes. This characteristic makes it the preferred reagent for protein, nucleic acid, and peptide labeling.
Етикетиране на протеини и функционални изследвания
FITC achieves specific labeling by binding to lysine residues of proteins such as antibodies and lectins. For example, in immunofluorescence experiments, FITC labeled antibodies can bind to cell surface antigens and quantitatively analyze antigen expression levels through fluorescence microscopy or flow cytometry. The experimental data shows that the fluorescence intensity of FITC IgG конюгата е линейно свързан с концентрацията на антиген и чувствителността към откриване може да достигне нивото на Данак . В допълнение, белязаните от FITC протеини могат да се използват и за изследвания на протеиновите взаимодействия, като анализиране на протеиновите конформационни промени чрез флуоресцентна резонансна енергия (FRET) {3 .

 

Етикетиране на нуклеинова киселина и молекулярна хибридизация
FITC може да бъде химически модифициран, за да маркира 5 'или 3' края на нуклеиновите киселини за флуоресценция in situ хибридизация (FISH) Технология . При изследване на рака, сондите, обозначени с рак, могат конкретно да се свържат с хромозомни анормични региони, за да подпомогнат диагнозата на хематологичните заболявания BCR-Abl Fusion Genes могат да показват жълти флуоресцентни сигнали в интерфазни клетъчни ядра със скорост на точност над 95%.
Пептидно етикетиране и доставка на лекарства
FITC labeled peptides play an important role in drug delivery systems. Taking M2PEP-FITC as an example, this molecule is composed of a targeting peptide M2PEP and a FITC fluorescent group, which can specifically recognize tumor cell surface receptors and achieve targeted drug delivery. Experiments have shown that the accumulation of M2PEP-FITC labeled liposomes in tumor Тъканите са 3 . 2 пъти повече от тези на свободните лекарства, като значително подобряват терапевтичната ефикасност и намаляват страничните ефекти.

Медицинска диагноза: От откриване на патоген до ранен скрининг на тумори

 

Флуоресцентните свойства на FITC го правят "златния стандарт" в областта на in vitro диагностиката, широко използвана в техники като имунохроматография, проточна цитометрия и ELISA .
Бързо откриване на патогени
FITC labeled antibodies can be used for rapid diagnosis of bacterial, viral, and parasitic infections. For example, in malaria diagnosis, FITC labeled anti malaria antibodies bind to the patient's blood smear, and the green fluorescence signal of the parasite is observed through fluorescence microscopy. The detection time is shortened from 2 hours in traditional methods to 15 минути, а чувствителността достига 98%. В допълнение, сондите, маркирани с NUCLEIC киселина, също могат да се използват за откриване на нуклеинови киселини на респираторни вируси, като гена ORF1AB на SARS-COV -2, със специфичност 99 {{10} 2%.

 

Туморни маркери
В проточна цитометрия,Fuorescein Isothiocyanatelabeled anti-CD45 antibodies can distinguish leukemia cells from normal blood cells. The data shows that the positive rate of FITC labeled CD34 antibody in the diagnosis of acute myeloid leukemia (AML) is 85%, which is 20% higher than traditional morphological examination. In terms of early screening of tumors, FITC labeled circulating tumor cells (CTC) Технологията за откриване може да улавя туморни клетки в изключително ниски концентрации в периферна кръв, осигурявайки нов метод за ранна диагностика на солидни тумори като рак на гърдата и рак на белия дроб .
Диагностика на автоимунни заболявания
В технологията ELISA, FITC, обозначени с автоантитела (като анти-ядрени антитела и анти-двойни наверирани ДНК антитела), могат да се използват за диагностициране на заболявания като системен лупус еритематозус (SLE). експериментите са показали, че FITC-ELISA има чувствителност от експериментите на FITC-ELISA има анти-ср. Антитела, което е значително по -добро от традиционните имунофлуоресцентни методи .

Изследване на клетъчната биология: От субклетъчна структура до динамично проследяване

 

Клетъчната пропускливост и ниската токсичност на FITC го правят идеален инструмент за изобразяване на клетки, широко използван в локализацията на органела, наблюдението на клетъчното деление и изследването на апоптозата .
Етикетиране на клетъчно органела и динамично наблюдение
FITC, обозначени с митохондриални сонди (като MitoTracker Green), могат конкретно да се свържат с потенциала на митохондриалната мембрана и да наблюдават морфологичните промени в митохондриите в реално време . в невроналните изследвания, FITC, обозначени с микротубулни протеини, могат да показват динамично удължаване на растежа на аксони, като микротубулни контейнери могат да показват динамично удължаване на растежа на аксони, които са показани на динамичните удължения на аксони, могат да показват динамично удължаване на растежа на аксони, които са показани на аксони, могат да показват динамично удължаване на растежа на аксони. Добавяне, Lysosome сонди, обозначени с FITC (Lysotracker Green), също могат да се използват за изследване на автофагичните процеси, като количествено определяне на броя на автофагозомите чрез промени в интензивността на флуоресценция .

 

Анализ на клетъчния цикъл и апоптоза
In flow cytometry, FITC labeled propidium iodide (PI) can bind to DNA and distinguish different stages of the cell cycle (G0/G1, S, G2/M) by fluorescence intensity. Experimental data shows that the sensitivity of FITC-PI double staining method for detecting cell apoptosis is 98%, which is 30% higher than the traditional trypan Метод на синьо оцветяване . В допълнение, FITC белязаните сонди Annexin V могат конкретно да се свържат с фосфатидилсерин, изложен на повърхността на апоптотичните клетки, постигайки прецизна идентификация на ранните апоптотични клетки .
Изследвания върху клетъчната миграция и инвазия
In Transwell experiments, FITC labeled cells can monitor the migration process in real-time. For example, in the study of tumor metastasis, the migration rate of FITC labeled breast cancer cells (MCF-7) through the matrix glue is positively correlated with the invasion ability, providing quantitative indicators for the screening of anti-tumor drugs.

Разработка на лекарства: От валидиране на целта до оценка на ефикасността

 

FITC играе множество роли в разработването на лекарства, включително валидиране на целта, оценка на системата за доставяне на лекарства и фармакокинетични изследвания .
Целева валидиране и механизъм на изследване на действията
FITC labeled small molecule inhibitors can be used to validate drug targets. For example, FITC labeled EGFR inhibitors (such as gefitinib) can demonstrate the binding of drugs to EGFR receptors on the surface of tumor cells, quantifying the binding affinity (Kd value) through fluorescence intensity. In addition, FITC labeled siRNA can also be used to Изучавайте ефективността на заглушаване на ген, осигурявайки основа за терапия с РНК интерференция .

Оценка на системата за доставяне на лекарства
FITC, обозначени с наночастици (като липозоми и полимерни микросфери), могат да наблюдават поведението на разпределението и освобождаването на лекарства in vivo в реално време .

 

Експериментите показват, че натрупването на FITC, обозначени с пегилирани липозоми в туморните тъкани, е 2 . 8 пъти по -голям от този на свободните лекарства, а флуоресцентният сигнал може да продължи 24 часа, предоставяйки визуални данни за оптимизиране на системите за доставяне на лекарства.

Фармакокинетични и токсикологични изследвания
FITC labeled drug molecules can be quantitatively analyzed for their absorption, distribution, metabolism, and excretion (ADME) processes in vivo through fluorescence imaging technology. For example, the fluorescence intensity of FITC labeled antibiotics (such as vancomycin) in the kidneys is linearly related to drug concentration, providing a basis for optimizing drug Дозировка . В допълнение, анализите за цитотоксичност, обозначени с FITC, също могат да оценят увреждането на лекарствата на нормалните клетки и да насочат оценките на безопасността .

Материално наука: От сензори до флуоресцентни сонди

 

Характеристиките на реакция на флуоресценция на FITC го правят уникално приложим в областта на материалознанието, включително разработването на pH сензори, температурни сензори и метални йонни сонди .
PH отзивчив флуоресцентен сензор
Интензивността на флуоресценцията наФлуоресцеин изотиоцианат is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8 . 0), флуоресценцията се угасва . въз основа на тази характерна, модифицираните наночастици FITC могат да се използват за наблюдение на вътреклетъчните колебания на киселината ., например, интензивността на флуоресценцията на FITC билирибин комплекс в туморна микроелева регистрация.

 

Флуоресцентна сонда, реагираща на температура
Животът на флуоресценцията на FITC се променя с температура . при нискотемпературни условия (4 градуса), животът на флуоресценцията на FITC белязани полимерни микросфери е удължен до 5 . 2 наносекунди, което е 1 . 8 пъти по -високи от стайната температура (25 градуса). Тази характеристика го прави идеален инструмент за изучаване на процесите на фазов преход и клетъчната криоконсервация.
Сонда за откриване на метални йони
FITC значително намалява интензитета на флуоресценцията, когато се комбинира с метални йони като Cu ² ⁺ и Hg ² ⁺, което го прави подходящ за мониторинг на околната среда . Например, наночастиците на силикагел на FITC имат граница на откриване на 0 . 1 nm за Hg ² ⁺ във вода, което е 100 пъти, отколкото по -високо, отколкото традиционните наночастици на силикагел.

Земеделие и добитък: от откриване на патоген до подобряване на разнообразието

 

Прилагането на FITC в селскостопанското поле постепенно се разширява, включително откриване на растителни вируси, диагностика на болестта на животните и идентификация на чистота с разнообразие .
Бързо откриване на растителни вируси
Вирусовите антитела, обозначени с FITC, могат да се използват за откриване на вирус на тютюн мозайка (TMV), вирус на мозайка от краставици (CMV) и други вируси . експериментите са показани, че чувствителността на FITC-ELISA за откриване на TMV е 0 . 1 Ng/ML, което е 10 пъти по-високо, отколкото традиционните сергиологични Методи . В допълнение, сондите, обозначени с нуклеинова киселина, също могат да се използват за откриване на екзогенни гени в генетично модифицирани култури, като например BT гени, устойчиви на насекоми.

Диагностика на заболявания на животните
Антителата, обозначени с FITC, могат да се използват за откриване на вирус на свинска треска (CSFV), вирус на грип (AIV) и други вируси .

 

In the diagnosis of swine fever, FITC labeled anti CSFV antibodies bind to tissue sections and observe virus distribution through fluorescence microscopy, reducing the detection time from traditional methods of 3 days to 6 hours. In addition, FITC labeled flow cytometry can also be used to detect pathogen specific T cells in animal blood and evaluate immune response intensity.
Идентификация на чистота на разнообразието
FITC labeled DNA probes can be used to identify the purity of crop varieties. For example, the FITC probe targeting the rice blast disease resistance gene Pi ta can accurately distinguish between homozygotes and heterozygotes in hybrid rice seeds, with a purity identification accuracy of 99.5%. In addition, SSR молекулярните маркери, обозначени с FITC, могат да се използват и за анализ на генетично разнообразие на породите от добитък и домашни птици, осигурявайки научна основа за размножаване.

Synthesis of FITC: 4-nitrophthalic anhydride (see C8H3NO5, [5466-84-2]) reacts with resorcinol at 195-200℃C for 10h, cyclizes into a mixture of 3 'nitrofluorescein and 4' - nitrofluorescein, acetylates with acetic anhydride, hydrolyzes with saturated sodium hydroxide ethanol solution, 4 "nitrofluorescein is obtained. Then 4 '- nitrofluorescein is dissolved in ammonia water, reacted with nickel Rexhlet and hydrazine hydrate at room temperature for 2h, and reduced to 4' - amino fluorescein. The most radical is ацилиран и елиминиран, за да се получиФлуоресцеин изотиоцианат.

FITC pure product is yellow or orange crystalline powder, which is easily soluble in water and alcohol solvent. There are two isomers, among which isomer type I is better in efficiency, stability and protein binding. The molecular weight of FITC is 389.4, the maximum absorption wavelength is 490~495 nm, and the maximum Дължината на вълната на емисиите е 520 ~ 530 nm, показваща ярко жълта зелена флуоресценция . FITC може да се съхранява в продължение на много години на студени, тъмни и сухи места и е най -широко използваната флуоресцеин . основното му предимство е, че човешкото око е по -чувствително към жълто зелено, а зелената флуоресценция в секционната екземпляра обикновено е по -малко от червено.

Популярни тагове: fluorescein isothiocyanate cas 27072-45-3, доставчици, производители, фабрика, на едро, купуване, цена, насипно състояние, за продажба